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《蛋白质研究技术》课程设置
2010-04-14 10:30   发布范围:公开

课程编号:040101

蛋白质研究技术

protein technology

授课单位:药学系生物制药学教研室

主讲人姓名、职称:张英起 教授

总学时及学分:72学时   3学分

课程内容简介:蛋白质是生物体内含量最高、功能最重要的生物大分子,对蛋白质的研究是阐述生命活动本质所不可或缺的内容。本课程主要介绍蛋白质研究的基础理论,其中:详细介绍了蛋白质研究的一般原则和以色谱技术为主的常用分离纯化技术的理论基础;介绍了基因重组蛋白质的体外培养、蛋白质表达以及原核细胞表达中常常出现的包涵体复性和纯化的解决方案;介绍了对蛋白质的理化性质和一级结构、空间结构的鉴定,以及多肽合成技术,以及对蛋白质进行化学修饰和改造。另结合蛋白质组学的研究需要,本课程还介绍了蛋白质组学、生物信息学及现代生物制药的内容。

教学目标:通过本课程的学习,使学生了解蛋白质研究的基本内容的同时,又能充分了解该领域快速发展的新技术和成果,同时设计了实验教学,使学生了解蛋白质研究技术的常用实验手段,掌握蛋白质研究从工程菌发酵、蛋白溶液的粗分离、精细纯化以至浓度测定、活性鉴定等一系列实验技能,使研究生能够掌握先进的研究方法,培训必要的实验技能,对进行课程研究及实验设计提供帮助。

教学要求:

教学方式及方法:课程讲授,分组实验

考核方式:笔试+实验

推荐使用教材:蛋白质研究技术,颜真、张英起,第四军医大学出版社,2007

推荐学习参考书目、文献及相关网站:

1.蛋白质化学与蛋白质组学,夏其昌等,北京:科学出版社,2004

2.蛋白质工程,王大成,北京:化学工业出版社,2002

3.www.dxy.cn

4.www.biotoo.com

预修课程获相关知识要求:生物化学、分子生物学、细胞生物学

教学大纲内容及学时分配:

理论课讲授内容(35学时)

第一章绪论                                  1学时

第二章蛋白质化学及蛋白质分离纯化的基础2学时

第三章蛋白质的提取和粗分离 1学时

第四章蛋白质的层析分离3学时

第五章蛋白质的电泳分离 3学时

第六章蛋白质纯化中的衔接技术 1学时

第七章基因工程菌的大规模培养 1学时

第八章工程菌生产的蛋白包涵体的复性与纯化2学时

第九章蛋白质分子量的测定 1学时

第十章高效液相色谱  2学时

第十一章蛋白质一级结构的测定 2学时

第十二章蛋白质空间结构的测定 3学时

第十三章蛋白质和多肽的化学合成技术 2学时

第十四章蛋白质的化学修饰                   2学时

第十五章蛋白质组学研究技术 3学时

第十六章药用蛋白质的研究进展                3学时

第十七章生物技术药物的研制原则和质量控制  3学时

实验课内容(32学时)

大肠杆菌表达重组蛋白的分离纯化及鉴定

1.工程菌的活化及发酵                        4学时

2.重组蛋白的粗提纯(裂菌、盐析、透析)      4学时

3.重组蛋白的色谱纯化(离子交换色谱)        6学时

4.重组蛋白的SDS-PAGE鉴定                  4学时

5.重组蛋白的Western blot鉴定                 6学时

6.HPLC鉴定蛋白纯度(凝胶过滤)               4学时

7.重组蛋白的浓度测定、生物活性测定          4学时

复习考试3+2

1.复习                                3学时

2.理论课考试                          2学时

考试成绩计算

1.理论课考试(开卷) 60

2.实验记录及实验结果 40

注:选修学员仅参加理论课学习和理论课考试,成绩按100分计算

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